Tipične komponente afluorescentni mikroskopsu:
Fluorescentne boje (fluorofori)
Fluorofor je fluorescentni spoj koji ponovno emitira svjetlost kada je pobuđen svjetlom.
Fluorofori obično sadrže nekoliko vezanih aromatskih skupina ili su planarne ili cikličke molekule s nekoliko π veza.
Mnoge fluorescentne boje dizajnirane su za mnoge biomolekule.
Neke od njih su male molekule koje su inherentno fluorescentne i vežu biomolekule od interesa. Glavni primjeri za to su boje nukleinske kiseline kao što su DAPI i Hoechst, phalloidin, koje se koriste za bojenje aktinskih vlakana u stanicama sisavaca.
izvor svjetlosti
Koriste se četiri glavne vrste izvora svjetlosti, uključujući ksenonske lučne žarulje ili živine žarulje s pobudnim filtrima, lasere i LED diode velike snage.
Laseri se uglavnom koriste u sofisticiranim tehnikama fluorescentne mikroskopije, dok se ksenonske žarulje, živine žarulje i LED diode s dikroičnim ekscitacijskim filtrima obično koriste u fluorescentnoj mikroskopiji širokog polja.
Uzbudni filter
Eksciter je tipično pojasni filtar koji propušta samo valne duljine koje apsorbira fluorofor, čime se minimizira ekscitacija iz drugih fluorescentnih izvora i blokira ekscitacijsko svjetlo u pojasu emisije fluorescencije.
dikroično ogledalo
Dihroični filtar ili filtar s tankim filmom je vrlo precizan filtar u boji koji se koristi za selektivnu refleksiju svjetlosti u malom rasponu boja dok reflektira druge boje.
Filtar emisije.
Odašiljač je obično pojasni filtar koji propušta samo valnu duljinu koju emitira fluorofor i blokira svu neželjenu svjetlost izvan ovog pojasa, posebno pobudnu svjetlost.
Filtri osiguravaju minimalnu pozadinu filtriranjem neželjene energije pobude (uključujući UV i IR) ili autofluorescenciju uzorka i sustava.
